印度西北部的大月氏所建立的贵霜帝国保障了帕提亚帝国东部的安全，因此帕提亚帝国自公元前1世纪中开始致力于对抗西部的罗马，拱卫西部疆域的安全。米特里达梯二世征服了亚美尼亚的一年后，来自奇里乞亚的罗马资深执政官卢基乌斯·科尔内利乌斯·苏拉与帕提亚帝国使节欧洛巴佐于幼发拉底河会晤，双方同意以幼发拉底河为罗马与安息的国界，但是作者罗丝·玛丽·谢尔登认为苏拉的权力只局限于将谈判条件传达给罗马当局。
在达成了协议后，帕提亚帝国仍发兵叙利亚，讨伐部落领袖劳迪丝及其塞琉古盟友安条克十世，安条克十世战死。末代塞琉古帝国皇帝之一的德米特里三世派遣军队围攻庇哩亚，帕提亚帝国派出援军驰援，结果德米特里三世被击败。
继米特里达梯二世之后，戈塔尔泽斯一世及奥罗德斯一世分别管治巴比伦尼亚及帕提亚，这种分离的君主体制削弱了帕提亚帝国，使亚美尼亚的提格兰二世吞并了美索不达米亚西部，这个地区在萨纳特鲁斯统治时期才得以收复。第三次米特拉达梯战争爆发后，提格兰二世的盟友本都王国国王米特里达梯六世请求帕提亚帝国支援以对抗罗马人，萨纳特鲁斯拒绝了他。罗马军官卢库卢斯在前69年进攻亚美尼亚首都提格雷诺塞塔，米特里达梯六世及提格兰二世向帕提亚帝国弗拉特斯三世求援，弗拉特斯三世同样不予理会。提格雷诺塞塔陷落后，弗拉特斯三世与卢库卢斯重申幼发拉底河是两国的国界。
弗拉特斯三世被儿子奥罗德斯二世和米特里达梯三世暗杀，奥罗德斯二世转而对付米特里达梯三世，米特里达梯三世由米底亚逃亡到罗马控制的叙利亚，罗马的叙利亚总督奥卢斯·加比尼乌斯率军抵达幼发拉底河支援米特里达梯三世，但他在不久后便掉头援助托勒密十二世救平埃及的动乱，米特里达梯三世失去了罗马的帮助仍能征服巴比伦尼亚，并在塞琉西亚铸造硬币。前54年，奥罗德斯二世部下的将军苏雷纳收复塞琉西亚，将米特里达梯三世处死。
前三头同盟之一的克拉苏后来成为了叙利亚总督，他在前53年入侵帕提亚，为米特里达梯三世提供迟来的支援。正当他的军队抵达卡雷的时候，奥罗德斯二世却入侵亚美尼亚，阻止罗马的盟友阿尔塔瓦兹德二世响应。奥罗德斯二世说服阿尔塔瓦兹德二世达成联姻，奥罗德斯二世的儿子帕科罗斯一世迎娶了阿尔塔瓦兹德二世的姐妹。
苏雷纳率领骑兵迎击克拉苏，苏雷纳的军队以1,000名长矛骑兵、9,000名弓骑兵组成，他们在数量上不及四倍于他们的罗马军队，克拉苏率领的军队由七个罗马军团及包括高卢人和轻骑兵的预备军组成。苏雷纳军中的1,000头骆驼带备辎重，为安息弓骑兵提供大量箭矢，他们采用“安息回马箭”战术，骑兵佯装撤退，然后回身射击敌人。
这个战术配合使用复合弓重创了克拉苏的骑兵，20,000名罗马战士阵亡，约10,000人被俘，另外10,000人向西逃走，克拉苏逃到亚美尼亚郊外。苏雷纳向克拉苏提出进行谈判，克拉苏接受了这个提议，当他来到苏雷纳的军营时，他部下一名初级军官怀疑有诈，并与安息人爆发冲突，克拉苏被杀。
卡雷战役的失败是罗马史上最严重的一次军事失利，相反帕提亚帝国的胜利刻画出他们是罗马难以应付的对手。苏雷纳在战后带同军队、战俘及战利品越过700公里抵达塞琉西亚举行庆典。不久后，奥罗德斯二世猜忌苏雷纳对王位的野心，于是将他处死。
受到战胜克拉苏的刺激，安息人试图征服罗马控制的西亚地区，储君帕科罗斯一世及其军官奥萨凯在前51年突袭叙利亚及安条克，但他们最终被盖乌斯·卡西乌斯·朗基努斯击退，奥萨凯被伏兵所杀。罗马执政官庞培与凯撒为了争夺权力而爆发战争，安息人支持庞培，甚至派遣军队参加前42年的腓立比战役。
前40年，效忠凯撒和布鲁图的将军昆图斯·拉宾努斯与帕提亚帝国一起对抗后三头同盟，帕科罗斯一世在翌年与他一起征战叙利亚。由于安东尼前往亚平宁半岛召集军队对抗政敌屋大维，并在布林迪西进行谈判，故他未能领导军队抵抗安息人的入侵。帕科罗斯一世攻占叙利亚后，拉宾努斯分兵入侵安那托利亚，而帕科罗斯一世及其将军拜尔宰法厄尼斯入侵累范特。他们征服了地中海沿岸的所有据点，南抵普托利迈伊斯，孤立了泰尔。支持罗马的犹太大祭司依尔卡诺二世、法撤尔及大希律王在犹太山地被安息人及他们的盟友、安提柯二世击败，大希律王逃到马萨达，安提哥那二世成为了犹大山地的统治者。
安东尼旗下的将军普布利乌斯·文提第乌斯·巴苏斯发动的反击将安息人逐出累范特，他在前39年的乞里乞亚门战役生擒及处死了拉宾努斯。不久后，将军法尔那帕特领导的安息军队在阿马努斯山口战役被巴苏斯击败，使帕科罗斯一世撤回叙利亚。前38年，帕提亚帝国再度入侵叙利亚，帕科罗斯一世率军在安条克东南的金达鲁斯山战役对抗巴苏斯，帕科罗斯一世阵亡，安息军队撤回到幼发拉底河的另一面。帕科罗斯一世之死令帕提亚帝国失去了储君，奥罗德斯二世另立弗拉特斯四世为他的继承人。
为了铲除异己，弗拉特斯四世登基后杀害及流放他的亲兄弟，他的其中一名亲兄弟莫纳伊西斯投靠安东尼，并说服他入侵帕提亚。安东尼在前37年击败了帕提亚帝国的盟友安提哥那二世，安插大希律王作为当地的代理君王。翌年，安东尼大军掩至埃尔祖鲁姆，亚美尼亚的阿尔塔瓦兹德二世再次改变阵营，他派遣了军队支援安东尼，安东尼随后入侵帕提亚帝国盟友阿尔塔瓦兹德一世管治的阿特罗帕特尼，试图攻陷都城帕拉亚斯帕，帕拉亚斯帕的实际地理位置仍未能确认。
不过，弗拉特斯四世伏击安东尼的后军，催毁了意图用在进攻帕拉亚斯帕的巨型攻城锤，阿尔塔瓦兹德二世也脱离了安东尼的大军。安息人乘胜将安东尼追赶到亚美尼亚，大势已去的安东尼军队最终抵达叙利亚。安东尼假意提出与阿尔塔瓦兹德二世联姻，阿尔塔瓦兹德二世落入了他的陷阱而被擒，阿尔塔瓦兹德二世被送到罗马处死。阿尔塔瓦兹德一世与弗拉特斯四世的关系转差，安东尼试图与阿尔塔瓦兹德一世结盟，但是安东尼在前33年撤离亚美尼亚，这个计划也因此而流产。安东尼离开了亚美尼亚，使帕提亚帝国盟友阿尔塔夏二世登上亚美尼亚的王位。
安东尼在前31年的亚克兴角战役战败，屋大维得以巩固他的政治力量，并在前27年被元老院取名为奥古斯都，成为第一位罗马皇帝。大约在同一时期，帕提亚帝国的梯里达底二世推翻了弗拉特斯四世，但是弗拉特斯四世在斯泰基游牧民族的协助下重新获得统治地位，提里德特斯二世挟持着弗拉特斯四世其中一名儿子逃到罗马人控制的地区。双方在前20年展开谈判，弗拉特斯四世为了争取对方释放他的儿子而将在卡雷战役夺得的鹰标及还幸存的战俘归还给罗马，安息人认为他们付出了很少的代价换取王子的归来，而奥古斯都则认为鹰标的重返是政治上的胜利。罗马方面为了纪念鹰标的归来而铸造硬币，并兴建新的广场来摆放鹰标，甚至在第一门的奥古斯都像上的护胸甲上刻画了鹰标回归的情景。
奥古斯都除了归还了王子之外，还向弗拉特斯四世赠送了一名亚平宁半岛女奴，那位女奴在后来成为了穆萨皇后。为了确保她的儿子弗拉塔西斯能够顺利继位，穆萨说服了弗拉特斯四世将其他王子送到奥古斯都那里当作人质，奥古斯都又以此来宣扬帕提亚帝国向罗马俯首，并将此列作奥古斯都神的功业的重大成就之一。弗拉塔西斯在公元前2年继位为弗拉特斯五世，穆萨嫁给了自己的儿子，并与他一起分享统治权力。安息贵族反对由外族血统来继承安息王位，并且反对出卖叙利亚的利益给罗马人，于是在公元前4年废黜他们并将他们流放到罗马控制的地区。弗拉特斯五世的继承人奥罗德斯三世只在位了两年，继其位的沃诺奈斯一世是早前被送到罗马当作人质的王子之一，波斯贵族不满沃诺尼斯一世同情罗马人，于是转而支持阿尔达班二世，阿尔达班二世将沃诺奈斯一世击败并流放到罗马控制的叙利亚。在其统治时期，安息王朝人口达到830万人。
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